Главная — Деятельность ПЦР-лаборатории — Обеззараживание исследуемого материала — Формула метода и материально-техническое обеспечение

Формула метода и материально-техническое обеспечение

Формула метода

Рекомендуемые средства стерилизации материала при ПЦР-анализе имеют следующие механизмы антимикробного действия. Мертиолят натрия необратимо связывается с SH-, NH2— и СООН-группами белковых молекул с дальнейшим ингибированием дыхательной цепи микроорганизма.

Инактивирующий эффект лизирующего буфера обусловлен действием хаотропного агента — гуанидинтиоцианатом, обеспечивающим разрушение клеточных мембран и лизис клеток с последующим выходом ДНК.

Метод обеззараживания содержащих споры микроорганизмов основан на прорастании споры в вегетативные клетки при культивировании в благоприятных для герминации условиях. Далее под воздействием температуры (для сибиреязвенного микроба еще и пенициллина) происходит разрушение клеточной мембраны и выход ДНК.

Материально-техническое обеспечение

(указанные средства измерения и оборудование может быть заменено на аналогичную по характеристикам продукцию других фирм)

Средства измерения:

  • Весы PG 203 — прецизионные одночашечковые электронные цифровые с функцией обнуления тары и другими вспомогательными функциями, стандартного уровня, максимальная загрузка — 210 г, погрешность при измерении — 0,001 г, (Mettler, Швейцария);
  • Иономер рН-150 (рН-метр-милливольтметр); используется для определения рН буферных растворов диапазон рН от -1 до 14, точность 0,01 рН, температура анализируемой среды от -10° до 100°С (Белоруссия).

Оборудование:

  • дистиллятор А1013 — производительность 7,6 л/ч (Barustead, США);
  • термостат ЕВ — объем от 18 до 1000 л с регулируемым диапазоном температур от 5° до 80°С, (Jouan, Франция);
  • встряхиватель V-4 типа вортекс регулируемый, (Elmi, Латвия);
  • микроцентрифуга для пробирок типа «Eppendorf’ — СМ-50 — 12×1,5 (0,5) мл ,до 12000 об/мин, ротор — угловой, (Elmi, Латвия);
  • баня водяная J-12 (18,30) с корпусом из нержавеющей стали с термометром, на 12,18,30л, вместимостью соответственно 72,108 и 192 пробирки диаметром 16 мм; максимальная температура 100°С, (Jouan, Франция).

Вспомогательные изделия и материалы

  • вата медицинская ГОСТ 5556-81;
  • микроцетрифужные пробирки-виалы типа Eppendorf 0,5-1,5 мл;
  • колбы мерные ГОСТ 12738-77 50, 100, 200 мл;
  • лабораторный штатив ТУ 64-17-07-72;
  • микродозаторы «Ленпипет» Россия, 1-20,20-200,200-1000 мкл;
  • наконечники для микродозаторов «Ленпипет», Россия;
  • пробирки ГОСТ 10-515-75;
  • пипетки мерные ГОСТ 20292-74;
  • цилиндры мерные ГОСТ 1770-74 1-25, 1-100, 1-1000мл.

Реактивы и растворы

  • вода дистиллированная;
  • вода деионизованная;
  • ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) ГОСТ 10652-73;
  • натрия гидроокись ГОСТ 4328-77;
  • гуанидинтиоцианат «Serva» Германия;
  • дитиотрейтол;
  • соляная кислота ХЧ ГОСТ 3118-67;
  • спирт этиловый ГОСТ 183000-87 (ректификат);
  • мертиолят натрия;
  • бензилпенициллин.

Похожие статьи:

Примите к сведению

Информация на этом сайте представлена в справочных и образовательных целях и не должна быть использована как инструкция по лечению. В любых случаях необходимо консультироваться у врача.